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EZ Trans siRNA转染试剂

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产品货号
产品规格
原价
  • AC04L051
    300uL
    700
  • AC04L052
    1mL
    1800
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产品描述

EZ Trans siRNA 转染试剂,是一种基于阳离子高分子聚合物开发的新型转染试剂,适用于siRNA及microRNA (miRNA)的转染。本产品经过配方升级,能在多数常见细胞中实现高效转染、低细胞毒性,且具有操作简便,稳定性好,兼容性强等优点,转染前后不用考虑血清和双抗影响,大部分细胞转染后不需要换液。

订购信息

产品名称

货号

规格

EZ Trans siRNA转染试剂

AC04L051

300 uL

EZ Trans siRNA转染试剂

AC04L052

1 mL

产品组分

组分

AC04L051

AC04L052

A.        siRNA转染试剂

300 uL

1 mL

B.        增强剂Booster

1 mL

3×1 mL

运输与保存

蓝冰运输。4℃保存,有效期12个月,长期不使用建议放置于 -20℃。注:避免反复冻融。

使用方法(以 24 孔板为例,其他培养皿中转染请参考表 1)

1. 接种细胞

对于贴壁细胞:转染前一天,将细胞按照每孔 1-2×105个细胞的量进行铺板,使其在转染时密度为60%-80%为佳。

2. 准备EZ Trans - siRNA复合物:

(1)     对于每孔细胞,取1μL siRNA溶液(20μM)与5μL Booster 溶液充分吹打,吹打混匀后,吸取2μL EZ Trans siRNA 转染试剂与上述混合液混和吹打均匀,室温孵育5min。注:本转染试剂需恢复至室温,涡旋、瞬离后使用。

(2)     往上述混合物中加入12μL无菌PBS或Opti-MEM或细胞完全培养液,形成20μL EZ Trans-siRNA复合物。

3. 细胞转染:

(1)     把20μL上述 EZ Trans-siRNA复合物入到24 孔板的一个孔中,摇动混匀培养板中的液体。

(2)     在 37℃,5% CO2 培养箱培养 24-48 h,之后即可检测基因干扰效果或者后续功能实验。

转染步骤

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注意事项

1.       本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。

2.       特别注意,请务必按照图中加样顺序配制转染复合物,切勿将siRNA 溶液先与稀释液或EZ Trans siRNA转染试剂混合。

3.       本转染试剂需恢复至室温,涡旋、瞬离后使用。

4.       建议配制转染复合物最小体积为30 μL,以免吸取转染试剂量过少,影响复合效果与转染效率。

5.       加入配制完的转染复合物后,无需换液,24h 后可进行mRNA 检测。如需进行更长时间培养,可在加入siRNA 转染复合液24h 后,更换为新鲜培养液,以保证细胞生长所需营养成分。(可选:如在加完转染复合物12h 观察到有细胞生长缓慢,可在转染后12h 进行换液。)

6.       抑制效率与目的基因和siRNA工作环境相关性很大,可根据实验需要增加或减少siRNA的用量,获得最佳抑制效率。EZ Trans siRNA转染试剂经过优化,对细胞基本无毒,比例放大2-3倍用量,一般不会对细胞产生明显毒性。

表 1:不同培养皿对应的待转siRNA、 EZ Trans试剂、稀释液用量

培养器皿(每孔)

培养液体积(mL)

siRNA(20 μM)(μL)

增强剂Booster (μL)

转染试剂 (μL)

复合物稀释液 (μL)
  (PBS或完全培养液)



96 孔板

0.1

0.2

1

0.4

2.4


24 孔板

0.5

1

5

2

12


12 孔板

1

2

10

4

24


6 孔板

2

4

20

8

48


60 mm 培养皿

4

8

40

16

96


100 mm 培养皿

10

20

100

40

240



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本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。

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业务经理:18616108315

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