EZ Trans细胞转染试剂（高效）-转染试剂-和元李记（上海）生物技术有限公司

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EZ Trans细胞转染试剂（高效）

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产品货号

产品规格

原价

AC04L091

1mL

300
AC04L092

50mL

3200

下载说明书李记-葛(18616108315)

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产品描述

EZ Trans细胞转染试剂（高效），作为新一代的转染试剂，其转染原理是带正电的阳离子聚合物与核酸中带负电的磷酸基团形成带正电的复合物后与细胞表面带负电的蛋白多糖相互作用，并通过胞吞作用进入细胞。

本产品经过李记生物的优化处理，具有转染效率高，细胞毒性低，操作简单，重复性好，适用范围广等特点。

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产品优势

1、本产品原料为阳离子聚合物，与阳离子脂质体非常类似，基本能完全替代Li**；

2、用量、用法和Li**一样，大包装价格只有他们的1/40，带给您极致的性价比。

3、案列、文献可于官网-资源支持查询！

产品组分

产品名称	规格
EZ Trans细胞转染试剂（高效）	1 mL
EZ Trans细胞转染试剂（高效）	50 mL

运输与保存

蓝冰运输。4℃保存，有效期12个月。【注】：不可冷冻！

本产品仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。

问：李记有3款转染试剂，这3款有什么区别？和Li**对比效果如何？
答：我司自行测试与收集客户反馈数据，得到类似结论：效率方面：EZ Trans Plus＞Li**2000≈EZ Trans(高效)＞Li** 3000＞EZ Trans(低毒)。毒性方面：EZ Trans(低毒)≈Li**3000＜EZ Trans Plus＜EZ Trans(高效)≈Li**2000。"
问：我们传的细胞有抗生素，抗生素是绝对会影响转染效率吗？
答：能不加尽量不加，理论上抗生素进不到细胞内，但是在转染试剂的作用下，细胞的通透性增加，抗生素可能进到细胞内，对实验结果完成影响。
问：protocol提到，要用Opti-MEM稀释质粒和转染试剂。不能用1640稀释么？另外质粒和转染试剂为什么要先稀释然后再混合？不能把转染试剂直接加到质粒溶液中混合，然后再加培养基稀释么？
答：EZ Trans细胞转染液属于阳离子类型的转染试剂，它与DNA形成复合物需要一定的条件，在合适的浓度下，有利于阳离子包裹DNA形成良好形态的复合物进入细胞。如果直接把两者直接混合，两者容易很快形成聚合物，聚集相态多样，有可能使DNA暴露在表面，不容易进入细胞，进而降低转染效率。所以EZ Trans和DNA的混合顺序也很重要。培养细胞大多会用到胎牛血清，血清成分复杂，没有人能说清成分及含量。细胞转染液成分比较明确，但是不能确定是会不会与胎牛血清的不知名成分结合，事实上这种现象在大多数转染试剂中都会造成不良影响，所以在形成EZ Trans-DNA复合物过程中要避免血清的影响。
问：protocol提到，“24-48小时内检测转染效率”指的是去除含复合物的培养液换成含血清的培养基之后的24-48h，还是指加入复合物后转染24-48h？
答：所有时间都是从EZ Trans-DNA复合物与细胞接触开始算。
问：我就是问的体内直接转染小鼠。你们现有的protocol是体外实验的方法?
答：体内直接转染目前最多的是腺病毒，慢病毒，腺相关病毒。转染试剂直接在体内用的报道我们目前没有听过。现有的做法是细胞在体外培养，转染筛选后再打入体内。
问：protocol提到：EZ Trans都进行转染DNA，而我现在是要转染siRNA，可以实现么？
答：转染RNA，可以转的，但因为对不同细胞毒性不同，所以对RNA转染后的效率，和研究结果需要摸索（目前收集数据下来，有一半的客户反馈可以转RNA，一般客户反馈效果不好）。这方面和脂质体转染一样，一般转染RNA都是研究功能的，转染试剂的细胞毒性对判定小RNA的功能，可能有干扰，需要老师做预实验
问：protocol提到，是optimem培养基，那我们在cd2培养基中，可以用你们的EZ Trans进行转染么？
答：可以用这个培养基，只要不影响细胞生长就行。只不过转染配置的过程中，不加血清就行。如果不能用optimem来配制和转染，只能用cd2，那他就用cd2来配制和转染，当然最好能做下预实验。
问：转染效率低：制备DNA-转染试剂复合物时存在干扰或抑制因素
答：由于血清和抗生素会干扰DNA-转染试剂复合物的形成，在制备时，请使用无抗生素、无血清培养基或Opti-MEM培养基
问：转染效率低、细胞毒性大-细胞密度未优化
答：在DNA转染和DNA-siRNA共转染过程中，细胞密度控制在60%-70%之间；在siRNA转染过程中，细胞密度控制在50%左右
问：怎么确定确定实验的转染效率？
答：建议每次转染时，设定一个阳性对照，如绿色荧光蛋白(GFP）。
问：转染效率低-将转染复合物长时间放置于室温
答：EZ Trans细胞转染试剂应保存在4℃。转染复合物的最佳放置试剂和温度是室温条件下10-20分钟，长时间放置会显著地降低转染效率，请务必控制放置时间在20分钟之内。
问：转染效率低-高转速离心转染复合物
答：在形成转染复合物时，标准操作步骤推荐数秒内涡旋混合转染试剂和DNA或siRNA以生产高效转染复合物。如果想将粘附于管壁的复合物离心，请务必使用极低转速离心，如80g离心5秒。
问：细胞毒性大-DNA用量太大
答：建议绘制量效关系曲线来确定最佳的DNA用量。
问：细胞毒性大-转染试剂用量太大
答：建议绘制量效关系曲线来确定最佳的转染试剂用量。
问：细胞毒性大-转染时细胞状态较差
答：EZ Trans细胞转染试剂的转染效率不受培养液中的血清影响，因此建议转染过程中细胞的培养液使用含有10%胎牛血清和抗生素的完全培养液以改善细胞的状态。
问：细胞毒性大-稳定转染时抗生素加入太早
答：请在转染48h后加入选择用抗生素。

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