“和元李记”由和元生物 (股票代码：688238) 和李记生物合资成立的，主营“李记生物”“Life-ilab”试剂品牌
EZ Trans RNA转染试剂（下文简称EZ Trans）采用新型脂质体纳米材料，可用来转染siRNA、miRNA等150bp以内的小分子RNA和DNA，转染细胞包括绝大多数贴壁生长的细胞，如一般细胞株、肿瘤细胞株等。
本转染试剂是一类快捷高效即用型试剂溶液，仅需在EP管中将细胞培液与siRNA或miRNA等转染目的小 RNA同转染试剂混合，室温孵育约 2 min后加入完全细胞培养液中即可，血清对转染效果没有影响，实验过程无需刻意添加或更换培养液。
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产品名称 |
规格 |
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EZ Trans RNA转染试剂 |
1 mL |
蓝冰运输。4℃保存，有效期 12 个月。 【注】： 不可冷冻！
本产品仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。
Q：我们传的细胞有抗生素，抗生素是绝对会影响转染效率吗？
A：能不加尽量不加，理论上抗生素进不到细胞内，但是在转染试剂的作用下，细胞的通透性增加，抗生素可能进到细胞内，对实验结果完成影响。
Q：protocol提到，要用Opti-MEM稀释质粒和转染试剂。不能用1640稀释么？另外质粒和转染试剂为什么要先稀释然后再混合？不能把转染试剂直接加到质粒溶液中混合，然后再加培养基稀释么？
A：EZ Trans细胞转染液属于阳离子类型的转染试剂，它与DNA形成复合物需要一定的条件，在合适的浓度下，有利于阳离子包裹DNA形成良好形态的复合物进入细胞。如果直接把两者直接混合，两者容易很快形成聚合物，聚集相态多样，有可能使DNA暴露在表面，不容易进入细胞，进而降低转染效率。所以EZ Trans和DNA的混合顺序也很重要。 培养细胞大多会用到胎牛血清，血清成分复杂，没有人能说清成分及含量。细胞转染液成分比较明确，但是不能确定是会不会与胎牛血清的不知名成分结合，事实上这种现象在大多数转染试剂中都会造成不良影响，所以在形成EZ Trans-DNA复合物过程中要避免血清的影响。
Q：protocol提到，“24-48小时内检测转染效率”指的是去除含复合物的培养液换成含血清的培养基之后的24-48h，还是指加入复合物后转染24-48h？
A：所有时间都是从EZ Trans-DNA复合物与细胞接触开始算。
Q：转染效率低-没有生成高效率的DNA-转染试剂复合物
A：在制备生成DNA-转染试剂复合物时，请不要使用含有血清的产品。在大多数情况下，使用不含血清的DMEM培养液能获得高效率的DNA-转染试剂复合物。我们建议使用含血清介质转染，单主人南复合物必须在无血清中形成。注意：最好也能避免Opti-MEN培养液，即使其血清含量较低。
Q：转染效率低-生成DNA-转染试剂复合物过程中存在抑制复合物形成的抑制剂
A：不含血清的培养液是高效DNA-转染试剂复合物形成的关键。在生成复合物过程中，避免使用一下化学物质：高浓度的磷酸盐、硫酸软骨素、透明质酸、硫酸葡聚糖或其他硫酸化的蛋白聚糖等。
Q：转染效率低-转染试剂复合物中含有血清
A：在制备生成DNA-抓让试剂复合物时，请使用无血清培养基或者Opti-MEM培养。在大多数情况下，使用不含血清的DMEM培养基能获得提高效率的DNA-转染试剂复合物。
Q：转染效率低、细胞毒性大-细胞密度未优化
A：在DNA转染和DNA-siRNA共转染过程中，细胞密度控制在60%-70%之间；在siRNA转染过程中，细胞密度控制在50%左右。
Q：怎么确定确定实验的转染效率？
A：建议每次转染时，设定一个阳性对照，如绿色荧光蛋白(GFP）。
Q：转染效率低-将转染复合物长时间放置于室温
A：EZ Trans细胞转染试剂应保存在4℃。转染复合物的最佳放置试剂和温度是室温条件下10-20分钟，长时间放置会显著地降低转染效率，请务必控制放置时间在20分钟之内。
Q：转染效率低-高转速离心转染复合物
A：在形成转染复合物时，标准操作步骤推荐数秒内涡旋混合转染试剂和DNA或siRNA以生产高效转染复合物。如果想将粘附于管壁的复合物离心，请务必使用极低转速离心，如80g离心5秒。
Q：细胞毒性大-DNA用量太大
A：建议绘制量效关系曲线来确定最佳的DNA用量。
Q：细胞毒性大-转染试剂用量太大
A：建议绘制量效关系曲线来确定最佳的转染试剂用量。
Q：细胞毒性大-转染时细胞状态较差
A：EZ Trans细胞转染试剂的转染效率不受培养液中的血清影响，因此建议转染过程中细胞的培养液使用含有10%胎牛血清和抗生素的完全培养液以改善细胞的状态。
Q：细胞毒性大-稳定转染时抗生素加入太早
A：请在转染48h后加入选择用抗生素。
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