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Cyvita MSC细胞冻存液

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Product Specifications
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  • AC05L225
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产品描述

Cyvita MSC细胞冻存液是一种即用型无血清细胞冻存液,采用化学成分明确的无动物源配方,含10%DMSO及多种细胞营养成分,可显著提高细胞冻存复苏存活率。该产品对各种类型的间充质干细胞(MSC)具有非常好的效果,同时适用于多种动物细胞系(如293T、CHO)、免疫细胞(如NK、T、THP1)及其他类型干细胞(如iPSC)的冻存,具有安全性高(无血清污染风险)、冻存效果稳定、操作简便等特点,支持-80℃短期储存(6个月)及非程序化冻存,是替代传统血清冻存液的理想选择。

订购信息

产品名称

货号

规格

Cyvita MSC细胞冻存液

AC05L225

100 mL

运输与保存

常温运输。4℃保存,有效期18个月。

使用方法

细胞冻存步骤(如图1):

1.         使用常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞,并计数,确认所需冻存的细胞数量。

2.         将即冻存细胞收集于离心管中,1000 rpm 离心 5 min左右,收集细胞沉淀,并弃掉上清液。

3.         加入适量PBS重悬细胞沉淀,1000 rpm 离心 5 min左右,收集细胞沉淀,并弃掉上清液。注意:清  洗步骤,可清洗掉残留消化液等。

4.         加入适量的冻存液至离心管中,最后的细胞保存浓度为 1×106至 5×106/mL,轻柔混匀细胞,形成细胞混合液。

5.         将细胞混合液按 1~1.5 mL 每管分装于冻存管中。

6.         将冻存管直接置于 -80℃ 保存,如需长期冻存,第二天转移至液氮里保存。

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图1

 

细胞复苏步骤(如图2):

1.         先准备体积为冻存液体积9倍的完全培养基,预温至室温或37℃。

2.         从-80℃取出冻存细胞,立即放入37℃ 水浴锅快速解冻,期间不断摇晃。待剩余1粒米大小的冰块时,迅速移出水浴。

3.         用 75% 酒精擦拭冻存管管壁,将细胞悬液转移至15 ml离心管。

4.         按1:9比例加入预温(室温或37℃)的新鲜培养基,混匀,1000 rpm,5 min离心,弃上清,获取细胞沉淀。注:稀释DMSO,防止温度上升后DMSO产生的细胞毒性;稀释后离心弃上清,残留的DMSO更少

5.         加入适量预温的新鲜细胞培养基,轻柔混匀,并将混合液转移至培养容器,观察细胞状态正常后,进行后续细胞培养工作。

image.png

图2

注意事项

1.     本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。

2.     细胞在加入冻存液分装后,应减少在外存放时间,尽快移入到 -80℃ 超低温冰箱。

3.     首次对一些难冻存细胞进行冻存时,建议在使用前对所冻存的胞进行1周以上的试验性细胞冷冻保存测试,摸索好冻存条件和确认性能后再进行正式冻存。

4.     本产品含有10% DMSO,部分对 DMSO 敏感的细胞,建议对其进行至少1周的本产品试验性的细胞冻存培养测试,摸索好冻存条件和确认性能后再正式冻存。

5.     细胞复苏时,取出的冻存细胞,应立即放在37℃水浴轻摇,接近完全融化时取出,避免悬液升温产生DMSO毒性,迅速解冻有助于提高复苏效率。

6.     建议复苏操作将复苏悬液1:9稀释后离心收集,优点:稀释DMSO,防止温度上升后DMSO产生的细胞毒性;稀释后离心弃上清,残留的DMSO更少。

7.     对于较为脆弱或珍贵的细胞,建议在-80°C的存放过夜后,应转移至液氮罐中长期保存。

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